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RNA的提取方法大總結

RNA的提取方法大總結這篇文章主要講的是幾種常用的RNA提取方法。1、異硫氰酸胍氯化銫超速離心法原理：使用蛋白質變性劑異硫氰酸胍有效抑制RNA酶的活性，經(jīng)過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質，進行密度梯度超速離心，RNA沉淀于管底，而DNA與蛋白質在上清中。使用這種方法，不但能得到高質量的RNA，而且能同時分離出細胞染色體DNA.本法對于冷凍時間長、細胞質和細胞核不易分離的組織標本以及富含RNA酶的組織細胞（如胰腺）的RNA提取尤其適合。此法提取的RNA的質量好和成功率高...

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抗體洗脫液的原理介紹

抗體洗脫液的原理介紹日益增長的抗體使用，研究目的蛋白種類一日千里，那么膜的再使用能夠節(jié)約研究時間，推進研究進程，在不影響實驗準確的前提下，那么在使用的意義是很明顯的?，F(xiàn)在這里我來講一下抗體洗脫液--strippingbuffer。在介紹抗體洗脫液的原理前，先來看看抗原抗體結合的一些環(huán)境條件吧，通常我們的抗體稀釋液選擇是：TBST和PBST，這里的兩種抗體稀釋液的pH值均在7.4-7.8之間。那么問題就來了，為什么抗體稀釋液的pH值是這樣的呢？抗原抗體的結合反應：抗原與抗體能夠...

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簡述tbst與pbst的區(qū)別及配置

簡述tbst與pbst的區(qū)別及配置TBST是TBS+Tween的縮寫，生物實驗中提到的PBST是指PBS溶液加上Tween-20。那么tbst與pbst都有上面區(qū)別呢？tbst與pbst的區(qū)別：1、TBST的pH值隨溫度變化大一點，而PBST似乎容易有沉淀，若稀釋抗體后需要反復使用的話建議使用TBST溶解。2、兩種洗液用起來沒有什么區(qū)別，都是提供一個緩沖的PH值環(huán)境，加上吐溫20有助于蛋白的洗脫。PBST的磷酸鹽緩沖液加Tween-20，而TBST是Tris緩沖液加Tween...

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Western Blot內參抗體選擇原則

WesternBlot內參抗體選擇原則內參抗體種類很多，比如beta-actin、beta-tubunlin、GAPDH、α-tubunlin等，那么針對自己的實驗，我們該如何選擇呢?下面簡單介紹下選擇內參抗體應遵循的原則：一.樣本種屬來源：先要考慮的就是實驗樣本來源于什么物種。1、哺乳動物的組織或者細胞樣本，通常選擇β-actin、β-tubulin、GAPDH、LaminB、HistoneH3、Na,Katpase等。2、植物來源實驗樣本，則可以選擇plantactin、...

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Tris的主要應用及緩沖能力

Tris的主要應用及緩沖能力Tris中文名稱：三（羥甲基）氨基甲烷英文名稱：Tris;Tris(Hydroxymethyl)aminomethaneTris是一種有機化合物，白色微黃色結晶性粉末或塊，化學式C4H11NO3，溶于乙醇和水，微溶于乙酸乙酯、苯，不溶于四氯化碳。25°C時溶解度（mg/mL）：水550、乙二醇79.1、甲醇26、無水乙醇14.6、95%乙醇22.0、N，N-二甲基甲酰胺14，戊醇2.6，丙醇2.0，乙酸乙酯0.5、環(huán)己烷0.1。水溶液不吸收二氧化碳...

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干酪素的性狀及用途

干酪素的性狀及用途英文名稱：casein。別名：乳酪素，酪蛋白，酪脘，酪素。干酪素的性狀：干酪素為白色無定形粉末或顆粒。是一種含磷復合蛋白。經(jīng)電泳分析有不少于20中的磷蛋白組分，主要成分為α-酪蛋白和β-酪蛋白。干粉無臭，無味。有吸濕性。干燥時性質穩(wěn)定，潮濕時易變壞。溶于堿性水溶液，溶于濃鹽酸呈淺紫色，幾乎不溶于水和非極性有機溶劑。相對密度1.25～1.31，等電點4.7。干酪素的制備方法：（1）新鮮牛奶脫脂，加酸（乳酸、乙酸、鹽酸或硫酸），將pH調4.7，使干酪素微膠粒失去...

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淀粉知多少

淀粉知多少淀粉是我們日常生活中經(jīng)常接觸到的物品，但它并不像我們想象中的那么簡單。淀粉都有種類呢？它們又有哪些區(qū)別？下面我們主要了解以下三種淀粉：1、直鏈淀粉2、支鏈淀粉3、可溶性淀粉。共同特點：白色粉末狀（可溶性淀粉優(yōu)勢也呈淡黃色）；無臭，無味；有吸濕性；不溶于冷水、乙醇不同點：1、結構上：直鏈淀粉是D-葡萄糖基以a-(1,4)糖苷鍵連接的多糖鏈，支鏈淀粉是借a-(1，4)糖苷鍵和4%的a-(1，6)糖苷鍵相連的支鏈葡萄糖單位組成的。可溶性帶奶粉又稱為淀粉糊精，是淀粉經(jīng)過一定...

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果膠酶的化學性質及用途介紹

果膠酶的化學性質及用途介紹果膠酶廣泛分布于高等植物和微生物中，本質上是聚半乳糖醛酸水解酶,果膠酶水解果膠主要生成β-半乳糖醛酸,可用次碘酸鈉法進行半乳醛酸的定量,從而測定果膠酶活力。果膠酶的化學性質：一般為灰白色粉末，或棕黃色液體。商業(yè)用果膠酶的有效成分主要有三種酶。一種是果膠甲酯酶(Pectinpectylhydrolase)(EC3.1.1.11)，主要作用為催化甲酯果膠以脫去甲酯基，產(chǎn)生聚半乳糖醛酸苷鍵和甲醇。另一種是聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase；...

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