2017-23
甘氨酸同Tris(三羥甲基氨基甲烷)一起組成電泳緩沖液中的緩沖對,可以穩(wěn)定電泳過程中的PH值。在SDS-PAGE不連續(xù)電泳中,制膠緩沖液使用的是Tris-HCL緩沖系統(tǒng),濃縮膠是pH6.7,分離膠pH8.9;而電泳緩沖液使用的Tris-甘氨酸緩沖系統(tǒng)。在濃縮膠中,其pH環(huán)境呈弱酸性,因此甘氨酸解離很少,其在電場的作用下,泳動效率低;而CL離子卻很高,兩者之間形成導電性較低的區(qū)帶,蛋白分子就介于二者之間泳動。由于導電性與電場強度成反比,這一區(qū)帶便形成了較高的電壓梯度,壓著蛋白質...
查看更多
2017-111
Parafilm封口膜具有柔軟性,可塑性,防止水分流失,自動密封性,無味,容易切割,熱塑性塑料,半透明,無色等特點??梢钥焖儆行У孛芊鈱嶒炂髅?。具有防水防濕的性能,有效阻止樣品發(fā)揮和污染。有效保護無水物質??梢灾貜驼郫B使用,纏繞在尖銳外形物體上也不會被撕裂。具有良好韌性,21℃時也可拉伸接近兩倍的長度。隨溫度身高,繞韌性和柔軟度相應提升。不耐高溫,68℃時將會軟化具有粘性。物理性質:Parafilm封口膜是半透明的,有柔性的,熱塑性塑料,高性能防水材料,本身為無色,無嗅,無味...
查看更多
2016-1222
植物蛋白質提取方法總匯植物蛋白是蛋白質的一種,來源是從植物里提取的,營養(yǎng)與動物蛋白相仿,但是更易于消化。含植物蛋白豐富的是大豆。但在飲食中,植物蛋白和動物蛋白要搭配食用。植物蛋白盡管一般不如動物蛋白好,但仍是人類膳食蛋白質的重要來源。谷類一般含蛋白質6%-10%,不過其中必需氨基酸種或多種含量低(限制氨基酸)。薯類含蛋白質2%-3%。某些堅果類如花生、核桃、杏仁和蓮子等則含有較高的蛋白質(15%-30%)。豆科植物如某些干豆類的蛋白質含量可高達40%左右。特別是大豆在豆類中更...
查看更多
2016-1221
2016-125
RNAwait是一種無毒的可直接使用的樣品儲存液,能使細胞內的RNA與RNA酶分離,可以快速可靠地保存動物組織、細胞內的RNA。組織獲取后立即浸入RNAwait保存液中,在室溫可以保存7天,4℃可以保存4周,-20℃、-80℃標本可以長期保存,RNA穩(wěn)定存在不降解,取出后用各類方法抽提可以獲得高質量的RNA。操作流程:1.根據要保存的各樣本的體積,計算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應當是組織體積的10倍(如100mg組織約用1mlRNAwait)。2.將RNA...
查看更多
2016-122
Tris飽和酚是用Tris-HCl(pH8.0)飽和過的重蒸酚,為淺黃色透明液體,有刺激性氣味,上層為Tris鹽酸緩沖液,pH7.8,下層為酚相,內加有抗氧化的8-羥基喹啉。Tris飽和酚用于分離DNA。Tris飽和酚的配置:冰箱取出重蒸酚,室溫放置,之后68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂,加8-羥基喹啉0.1%和β-巰基乙醇0.2%,(原液14.4MOL/ML),混勻,溶液呈現黃色,倒入分液漏斗中(也可在燒杯中進行)加入等溶劑的1MOL/ML的Tris...
查看更多
2016-1116
單克隆技術又名雜交瘤技術。由G.K?hler和Milstein1975年創(chuàng)立。主要原理是利用產生抗體的B細胞與腫瘤細胞雜交融合成雜交瘤細胞,生產抗體。單克隆抗體的制備過程主要有以下六個環(huán)節(jié),具體為抗原指標、免疫動物選擇、免疫程序的確定、免疫、細胞雜交與選擇培養(yǎng)。下面詳細介紹單克隆抗體制備過程每一步的做法。1、抗原制備制備單克隆抗體的免疫抗原,從純度上說雖不要求很高,但高純度的抗原使得到所需單抗的機會增加,同時可以減輕篩選的工作量。因此,免疫抗原是越純越好,應根據所研究的抗原和...
查看更多
2016-1115
內參抗體種類很多,比如beta-actin、beta-tubunlin、GAPDH、α-tubunlin等,那么針對自己的實驗,我們該如何選擇呢?下面簡單介紹下選擇內參抗體應遵循的原則:一.樣本種屬來源:先要考慮的就是實驗樣本來源于什么物種。1、哺乳動物的組織或者細胞樣本,通常選擇β-actin、β-tubulin、GAPDH、LaminB、HistoneH3、Na,Katpase等。2、植物來源實驗樣本,則可以選擇plantactin、Rubisco等。3、其他來源樣本研究...
查看更多