2016-712
溴代十六烷基*胺(CTAB)的使用方法溴代十六烷基*胺簡(jiǎn)稱:CTAB,英文名稱Cetyltrimethylammoniumbromide,又稱鯨蠟烷*基溴化銨,十六烷基*基溴化銨,白色粉末狀,是一種季銨鹽溶于水,在酸性溶液中保持穩(wěn)定。是一種陽(yáng)離子去垢劑,用于從大量產(chǎn)生粘多糖的有機(jī)體如植物以及某些革蘭氏陰性菌(包括E.coli的某些株)中制備純化DNA。CTAB結(jié)構(gòu)式原理:CTAB是一種陽(yáng)離子去污劑,具有從低離子強(qiáng)度的溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性,在這種條件下,蛋白質(zhì)和中性...
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2016-620
微生物中所指的MH是Mueller-Hinton的字母縮寫,指的是水解酪蛋白。而MH培養(yǎng)基指的就是水解酪蛋白(Mueller-Hinton)培養(yǎng)基,可配置成MH血瓊脂培養(yǎng)基用于鏈球菌的藥物敏感實(shí)驗(yàn)。本文主要介紹的是MH培養(yǎng)基如何滅菌合適以及MH培養(yǎng)基的使用方法。MH培養(yǎng)基如何滅菌MH培養(yǎng)基可用濕熱滅菌法,115度30分鐘,作分離馴化蛋白酶的菌。MH培養(yǎng)基的使用方法:1、稱取本品38g,加入蒸餾水或去離子水1L,攪拌加熱煮沸*溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用....
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2016-620
MH培養(yǎng)基為MH瓊脂培養(yǎng)基,微生物中所指的MH是Mueller-Hinton的字母縮寫,指的是水解酪蛋白。所以MH培養(yǎng)基也成為水解酪蛋白培養(yǎng)基。常用作培養(yǎng)基原材料,提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的生長(zhǎng)因子。MH培養(yǎng)基的原理:牛肉粉和酸水解酪蛋白提供氮源、維生素和氨基酸;可溶性淀粉吸收有毒的代謝產(chǎn)物。MH培養(yǎng)基的成分:酸水解酪蛋白/酸水解酪素17.5g牛肉浸膏粉2g淀粉1.5g瓊脂12gMH培養(yǎng)基的用法:稱取本品21.0g,加熱溶解于1000ml?蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。M...
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2016-63
westernblot的作用免疫印跡是一個(gè)用于蛋白質(zhì)分析的常規(guī)技術(shù),在電場(chǎng)的作用下將電泳分離的蛋白從凝膠轉(zhuǎn)移一種固相支持物,然后利用抗原—抗體的特異性反應(yīng),從蛋白混合物中檢測(cè)出目標(biāo)蛋白,從而定量或定性地確定正?;?qū)嶒?yàn)條件下細(xì)胞或組織中目標(biāo)蛋白的表達(dá)情況。Westernblot還可用于蛋白—蛋白、蛋白—DNA和蛋白—RNA相互作用的后續(xù)分析,作為一種廉價(jià)、便捷、可靠的研究工具,將與質(zhì)譜和蛋白質(zhì)芯片等技術(shù)一起在蛋白質(zhì)組時(shí)代發(fā)揮重要作用。Westernbloting的注意事項(xiàng)1、為...
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2016-63
Westernblot法即是一種將電泳與KIJSA結(jié)合起來(lái)的技術(shù),可分為電泳、轉(zhuǎn)印、酶免疫測(cè)定3個(gè)階段。Westernblot法結(jié)合了電泳的高分辨率和酶免疫測(cè)定的高敏感性和特異性,是一種能用于分析樣本組分的免疫學(xué)測(cè)定方法。westernblot的作用與SouthernBlot或NorthernBlot雜交方法類似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測(cè)物是蛋白質(zhì),“探針”是抗體,“顯色”用標(biāo)記的二抗。經(jīng)過(guò)PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖...
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2016-63
核酸抽提與純化是分子生物學(xué)試驗(yàn)的基礎(chǔ),核酸純化方法是影響提取核酸質(zhì)量高低的重要因素,也是下游分子生物學(xué)試驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。核酸純化的方法及原理如下:一、PC抽提法PC抽提是去除蛋白質(zhì)有效的手段,但超過(guò)了該飽和度,裂解體系中的蛋白質(zhì)不會(huì)被一次去除,必須靠多次抽提,方可*去除。且每次抽提都會(huì)損失部分核酸。另外,體系太粘稠的壞處是,蛋白質(zhì)難以*去除,以及基因組DNA會(huì)斷裂得更厲害,所以要注意裂解液與樣品的比例。PC抽提的另外一個(gè)用途是,利用酸性酚可以部分去除DNA的特點(diǎn),在RNA抽提時(shí)...
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2016-63
DMEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基,高糖型有利于細(xì)胞停泊于一個(gè)位置生長(zhǎng),適于生長(zhǎng)較快、附著較困難腫瘤細(xì)胞等。該類培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于疫苗生產(chǎn)和各種初代病毒宿主細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)及單一細(xì)胞培養(yǎng);如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等細(xì)胞系的培養(yǎng)。DMEM培養(yǎng)基的成分DMEM培養(yǎng)基的配制方法:1制備新鮮三蒸水或超純水。2稱取所需量的干粉培養(yǎng)基,加入約終體積一半的三蒸水中;若配制一個(gè)包裝的培養(yǎng)液,在將整個(gè)包裝的干粉倒入三蒸水后,...
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2016-63
血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長(zhǎng)因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,具有極為重要的功能.細(xì)胞培養(yǎng)血清的作用1.在細(xì)胞培養(yǎng)中提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物.2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、...
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