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MTT法檢測細胞活性步驟及原理

要知道MTT法檢測細胞活性步驟先要知道MTT是什么？MTTMTT是一種粉末狀化學(xué)試劑，全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，漢語化學(xué)名為3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽，商品名：噻唑藍。是一種黃顏色的染料。MTT法檢測細胞活性原理檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此...

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瓊脂糖凝膠電泳常見問題

瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。對于分子量較大的樣品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進行電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳常見為題都有哪些？、一、DNA帶模糊、1、DNA降解：瓊脂糖凝膠電泳試驗中要避免核酸酶污染2、電泳緩沖液陳舊：電泳緩沖液多系使用后，離子強度降解，PH值上升，緩沖能力減弱，從而影響電泳實驗，建議經(jīng)常更換電泳緩沖液。3、所用電泳條件不合適：電泳時電壓不應(yīng)超過20V/cm，溫度4、DNA上揚量過多：應(yīng)減少凝膠中DNA上樣量。...

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瓊脂糖凝膠電泳條件

瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法.其分析原理與其他支持物電泳的主要區(qū)別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，物質(zhì)分子通過時會受到阻力，大分子物質(zhì)在涌動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量，而且還取決于分子大小，這就大大提高了分辨能力。但由于其孔徑相當(dāng)大，對大多數(shù)蛋白質(zhì)來說其分子篩效應(yīng)微不足道，現(xiàn)廣泛應(yīng)用于核酸的研究中。瓊脂糖凝膠電泳條件電泳緩沖液的pH在6~9之間，離子強度0.02~0.05為...

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瓊脂糖凝膠電泳緩沖液配制

瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，物質(zhì)分子通過時會受到阻力，大分子物質(zhì)在涌動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量，而且還取決于分子大小，這就大大提高了分辨能力。在瓊脂糖凝膠電泳緩沖液又幾種適用于天然雙鏈DNA的電泳。瓊脂糖凝膠電泳緩沖液配置常見瓊脂糖凝膠電泳緩沖液配制（如圖）TBE通常作為5×或10×的貯存液配制和貯存。這種濃的貯存液pH應(yīng)為8.3左右，它在應(yīng)用前稀釋，并用同一種貯存液制備凝膠溶液和瓊脂糖凝膠電泳緩沖液。上述三種電泳緩沖液都比較好...

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聚丙烯酰胺凝膠電泳原理以及注意事項

聚丙烯酰胺凝膠電泳簡稱為PAGE（Polyacrylamide?gel?electrophoresis）聚丙烯酰氨凝膠電泳，是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質(zhì)的一種常用電泳技術(shù)。聚丙烯酰胺凝膠由單體丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺聚合而成，聚合過程由自由基催化完成。聚丙烯酰胺凝膠電泳作用：用于分離蛋白質(zhì)和寡核苷酸。聚丙烯酰胺凝膠電泳原理：常用的催化聚合方法有兩種：化學(xué)聚合和光聚合。化學(xué)聚合通常是加入催化劑過硫酸銨（AP）以及加速劑四甲基乙二胺（TEMED），四甲基乙二胺催化過硫酸銨產(chǎn)生自...

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MRS培養(yǎng)基的配制方法及原理

MRS培養(yǎng)基常用于食品中乳酸菌總數(shù)測定，自然pH通常是6.2—6.4，在做乳酸菌分離的時候直接使用自然pH就可以了，如果是做純培養(yǎng)，希望得到交好的菌落，或者是做液體培養(yǎng)，希望得到較多菌體的話，就把pH跳到6.7左右為佳。MRS培養(yǎng)基的原理蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、維生素、生長因子；葡萄糖為可發(fā)酵糖類；磷酸氫二鉀為酸堿緩沖劑；檸檬酸氫二銨、硫酸鎂、硫酸錳、吐溫-80和乙酸鈉為培養(yǎng)各種乳酸菌提供生長因子，其成分還能抑制某些雜菌；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。MRS培養(yǎng)基的配制蛋...

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MRS培養(yǎng)基成分

MRS培養(yǎng)基成分蛋白陳10.0g牛肉粉5.0g酵母粉4.0g葡萄糖20.0g吐溫801.0mL磷酸氫二鉀2.0g乙酸鈉5.0g檸檬酸三銨2.0g硫酸鎂0.2g硫酸錳0.05g瓊脂粉15.0g蒸餾水1000mL改良MRS培養(yǎng)基成分：胰蛋白胨10g磷酸氫二鉀2g葡萄糖20g無水醋酸鈉3g牛肉浸膏10g檸檬酸三銨2g酵母浸膏5g七水硫酸鎂0.2gX-Gal0.06mg吐溫-801mlL-半胱氨酸0.5g水或MJH水提液1000ml備注：培養(yǎng)基消后用5NNa0H調(diào)pH6.8；MRS培...

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MS培養(yǎng)基成分

MS培養(yǎng)基是目前使用普遍的培養(yǎng)基，用于植物組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。其具有較高的無機鹽濃度，能夠保證組織生長所需的礦質(zhì)營養(yǎng)還能加速愈傷組織的生長。ME培養(yǎng)基的成分MS培養(yǎng)基的無機養(yǎng)分的數(shù)量和比例比較合適，足以滿足植物細胞在營養(yǎng)上和生理上的需要。因此，一般情況下，不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機附加成分。和其它培養(yǎng)基的基本成分相比，MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量高，這是它的顯著特點。

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