2016-426
CellCountingKit-8簡(jiǎn)稱CCK-8試劑盒,為MTT法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒。可用于藥物篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、腫瘤藥敏等試驗(yàn)?;盍τ?jì)算:.細(xì)胞活力(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[A(0加藥)-A(空白)]×100A(加藥):具有細(xì)胞、CCK-8溶液和藥物溶液的孔的吸光度...
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2016-426
IPTG是一種作用*的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定,因此被實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用。IPTG溶液的配制很簡(jiǎn)單:在8ml蒸餾水中溶解2gIPTG后,用蒸餾水定容10ml,用0.22μm濾器過濾除菌,分裝成1ml小份貯存于-20℃。IPTG的使用方法:先把IPTG配制成24mg/ml(100mM)的水溶液,并進(jìn)行過濾除菌后保存。然后在100ml的瓊脂培養(yǎng)基中,加入100μl的上述溶液、200μl的X-Gal(20?mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和100μl的Amp(100mg/...
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2016-425
結(jié)晶紫染色液(CrystalVioletStainingSolution)是一種組織或細(xì)胞染色時(shí)常用的可以把細(xì)胞核染成深紫色的染色液。結(jié)晶紫是一種堿性染料,可以和細(xì)胞核中的DNA結(jié)合,從而產(chǎn)生細(xì)胞核染色。結(jié)晶紫染液的配制方法如下:結(jié)晶紫染液的配制結(jié)晶紫(crystalviolet)液:結(jié)晶紫乙醇飽和液(結(jié)晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸銨水溶液80mL將兩液混勻置24h后過濾即成。結(jié)晶紫染液使用方法1.樣品處理a)對(duì)于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘。換...
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2016-425
結(jié)晶紫(又叫甲基紫,俗名紫藥水)pH0.5(綠)~2.0(藍(lán))。以冰醋酸作溶劑,用酸滴定液滴定堿時(shí),常用的指示劑為結(jié)晶紫,還有α-萘酚苯甲醇(0.2%冰醋酸溶液,其堿式色為黃色,酸式色為綠色)和喹哪啶紅(0.1%甲醇液,其堿式色為紅色,酸式色為無色)結(jié)晶紫性狀:具有金屬光澤的暗綠色結(jié)晶形粉末。熔點(diǎn)為215℃(分解)。溶于水、乙醇和三氯甲烷,溶液呈紫色。不熔于,濃酸中呈黃色,當(dāng)pH值增大時(shí)其顏色變化是黃→綠→藍(lán)→紫.與Sn4+、Tl3+、Au3+和Sb3+的鹵絡(luò)陰離子及MoO、...
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2016-425
2016-425
染色液是實(shí)驗(yàn)室中常用的試劑之一,分為天然染液和人工染料,也分堿性染料和酸性染料,以下來詳細(xì)介紹一下實(shí)驗(yàn)室常見染色液的配制。⒈碘-碘化鉀(I2-KI)溶液能將淀粉染成藍(lán)紫色,蛋白質(zhì)染成黃色,也是植物組織化學(xué)測(cè)定的重要試劑。配方:碘化鉀2g;蒸餾水300ml;碘1g先將碘化鉀溶于少量蒸餾水中,待全溶解后再加碘,振蕩溶解后稀釋300mL,保存在棕色玻璃瓶?jī)?nèi)。用時(shí)可將其稀釋2-10倍,這樣染色不致過深,效果更佳。⒉蘇丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角質(zhì)化的細(xì)胞壁及脂肪、揮發(fā)油、樹...
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2016-422
免疫染色實(shí)驗(yàn)方法和步驟免疫染色(immunolstaining)包括免疫熒光(immunolfluorescence)、免疫組化(immunolhistochemistry)、免疫細(xì)胞化學(xué)(immunolcytochemistry)等,可以參考如下步驟進(jìn)行操作。1.樣品準(zhǔn)備(Samplepreparation)對(duì)于貼壁細(xì)胞:可以直接用多孔板,例如6孔板、24孔板等,培養(yǎng)細(xì)胞,然后到預(yù)定時(shí)間時(shí)進(jìn)行固定等后續(xù)操作。也可以用潔凈的蓋玻片,70%乙醇中浸泡后,用無菌的鑷子放置到6孔板...
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2016-422
DAPI染DNA的原理及使用方法DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),分子式為C16H15N5·2C3H6O3,分子量457.48。DAPI是一種能夠與DNA強(qiáng)力結(jié)合的熒光染料。它結(jié)合到雙鏈DNA小溝的AT堿基對(duì)處,一個(gè)DAPI分子可以占據(jù)三個(gè)堿基對(duì)的位置。結(jié)合到雙鏈DNA上DAPI分子的熒光強(qiáng)度提高大約20倍,常用與熒光顯微鏡觀測(cè),根據(jù)熒光的強(qiáng)度可以確定DNA的量。另外,因?yàn)镈API可以透過完整的細(xì)胞膜,它可...
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