2015-918
DTT(DL-Dithiothreitol)中文名為二硫蘇糖醇。分子式為C4H10O2S2,分子量為154.25,為常用還原劑,有抗氧化作用。DTT和巰基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性氣味要小很多,毒性也比巰基乙醇低很多。而且DTT比巰基乙醇的濃度低7倍時(shí),兩者效果相近。DDT的特性DTT是一種很強(qiáng)的還原劑,其還原性很大程度上是由于其氧化狀態(tài)六元環(huán)(含二硫鍵)的構(gòu)象穩(wěn)定性。它的氧化還原電勢(shì)在pH為7時(shí)為-0.33伏。由于容易被空氣氧化,因此DTT的穩(wěn)定性較差;但冷凍保存...
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2015-918
不銹鋼細(xì)胞過濾篩網(wǎng)采用不銹鋼制成,表面光滑,外觀精美,耐用。40目~800目等多種規(guī)格,一般多用于實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng),雜質(zhì)過濾,細(xì)胞分散,分樣等方面??梢灾貜?fù)使用,一般使用超聲波清洗后再滅菌。細(xì)胞篩分有柄不銹鋼過濾篩網(wǎng)和無柄不銹鋼過濾篩網(wǎng)兩種,用于科研實(shí)驗(yàn)操作簡單方便。細(xì)胞過濾篩的選擇細(xì)胞過濾篩的目數(shù)×孔徑=15000,根據(jù)實(shí)驗(yàn)材料所需過濾孔徑的大小來選擇相應(yīng)的目數(shù)的細(xì)胞篩。細(xì)胞過濾篩的使用1、洗干凈、但不能泡酸,可以直接用錫箔紙包好濕式消毒,使用時(shí)不能干磨,比較大的組織邊磨邊加...
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2015-92
TTC染色液的原理及作用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)是脂溶性光敏感復(fù)合物,常用于檢測(cè)種子的生存能力以及檢測(cè)哺乳動(dòng)物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,能與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色。正常腦組織和有活力種子胚組織活細(xì)胞中的脫氫酶可以將TTC還原成不溶性的紅色穩(wěn)定的三苯基甲臢(TTF),如果腦組織細(xì)胞或胚種細(xì)胞死亡或生活力衰退,則不能染色或染色較淺。因此可以根據(jù)染色部位和染色深淺程度來鑒定腦組織或者種子的活力。結(jié)果判斷正常組織被染成紅色,腦梗...
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2015-91
普魯士藍(lán)染色試劑盒的染色原理(伊紅法、中性紅法、核固紅法)普魯士藍(lán)染色試劑盒分為三種包括伊紅法、中性紅法、核固紅法等。染色原理基本相同,根據(jù)復(fù)染時(shí)染色液的不同區(qū)別為這3種方法。含鐵血黃素(hemosiderin)是一種血紅蛋白源性色素,為金黃色或棕黃色顆粒,因其含鐵、金黃色,故稱為含鐵血黃素。當(dāng)紅細(xì)胞被巨噬細(xì)胞吞噬后,在溶酶體酶的作用下,血紅蛋白被分解為不含鐵的橙色血質(zhì)和含鐵的含鐵血黃素。Perls普魯士藍(lán)反應(yīng)(Prussianbluereaction)又稱為含鐵血黃素染色,...
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2015-831
抗熒光衰減封片劑——含DAPI和不含DAPI的區(qū)別抗熒光衰減封片劑是一種用于減緩熒光衰減的封片試劑。以甘油為基礎(chǔ),加入抗熒光衰減劑,有強(qiáng)烈的抗熒光衰減作用,用于對(duì)熒光組織和細(xì)胞樣品的封片。封片后,樣品4℃或者-20℃避光可保存2-3周。在封片時(shí)用移液槍滴一滴抗熒光衰減封片液,蓋上蓋玻片就可以了。封片劑含細(xì)胞核DNA熒光染料DAPI,使實(shí)驗(yàn)操作更簡便;封片劑干燥后會(huì)形成一層牢固的涂層,光學(xué)透明,非常便于后續(xù)觀察、拍照與儲(chǔ)存。DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-d...
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2015-831
雷帕霉素的免疫抑制作用雷帕霉素雷帕霉素(Rapamycin,RAPA,RPM),又名Sirolimus,分子式為C51H79NO13,分子量為914.2,為白色固體結(jié)晶,熔點(diǎn)為183-185℃,親脂性,溶解于甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等有機(jī)溶劑,極微溶于水,屬大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。起初RAPA被研究作為低毒性的抗真菌藥物,1977年發(fā)現(xiàn)RAPA具有免疫抑制作用;1989年開始把RAPA作為治療器官移植的排斥反應(yīng)的新藥進(jìn)行試用。雷帕霉素(RAPA)通過不同的細(xì)胞因子受體阻斷信號(hào)傳導(dǎo),阻...
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2015-831
細(xì)胞凍存液的原理及配制方法細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在...
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2015-831
BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒檢測(cè)蛋白濃度的原理及特點(diǎn)堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+,Cu+與BCA試劑形成紫藍(lán)色的絡(luò)合物,測(cè)定其在562nm處的吸收值,并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比,即可計(jì)算待測(cè)蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS,TritonX-100,Tween不影響檢測(cè)結(jié)果,但受螯合劑(EDTA,EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實(shí)驗(yàn)中,若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可試用考馬斯亮藍(lán)(Bradford)蛋白濃度測(cè)定試劑盒。BCA法蛋白濃度檢測(cè)比考馬斯亮...
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