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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章CTAB作用原理

CTAB作用原理

更新時(shí)間:2015-12-01點(diǎn)擊次數(shù):12282

物理性狀

呈白色或淺黃色結(jié)晶體粉末狀,有刺激氣味,易溶于異丙醇,可溶于水,震蕩時(shí)產(chǎn)生大量泡沫。能與陰離子、非離子、兩性表面活性劑有良好的配位性。具有優(yōu)良的滲透、柔化、乳化、抗靜電、生物降解性及殺菌等性能。

作用原理

CTAB是一種陽離子去污劑,可溶解細(xì)胞膜, 具有從低離子強(qiáng)度的溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性。它能與核酸形成復(fù)合物:在高鹽溶液中(0.7 mol/L NaCl)是可溶的,當(dāng)降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)時(shí),從溶液中沉淀,通過離心就可將CTAB-核酸的復(fù)合物與蛋白、多糖類物質(zhì)分開。后通過乙醇或異丙醇沉淀DNA,而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。

 

用CTAB提取DNA組分

  • Tris-HCl(pH8.0)提供一個(gè)緩沖環(huán)境,防止核酸被破壞;

  • EDTA螯合Mg2+或Mn2+離子,抑制DNase活性;

  • NaCl 提供一個(gè)高鹽環(huán)境,使DNA充分溶解,存在于液相中;

  • β-巰基乙醇是抗氧化劑,有效地防止酚氧化成醌,避免褐變,使酚容易去除基因組DNA。

?注:CTAB溶液在低于15℃時(shí)會(huì)形成沉淀析出,因此,在將其加入冰冷的植物材料之前必須預(yù)熱,且離心時(shí)溫度不要低于15℃。

 

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