1. 葡聚糖凝膠預(yù)處理：

在室溫下，將葡聚糖凝膠干粉浸泡于蒸餾水中至少24小時(shí)，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，或者用熱水浸泡（不建議煮沸）至少1小時(shí)直至充分溶脹，凝膠體積不再變化。

注：在溶脹前，加入蒸餾水?dāng)嚢韬笫蛊渥匀怀两?，沉降后若上層溶液中漂浮的凝膠碎片顆粒較多，需要重復(fù)多次漂洗將其除去，防止層析時(shí)阻塞凝膠柱，影響流速。

2. 裝柱：

將溶脹好的凝膠根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi)，注意保持濕態(tài)裝柱，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層; 裝柱要均勻，可在凝膠耐受的操作壓下裝柱，裝好的凝膠柱可以檢測(cè)柱效，檢測(cè)過(guò)濾柱裝填是否合格。

凝膠層析分離度取決于柱高，為分離不同組分，凝膠柱床必須有適宜的高度：分級(jí)分離時(shí)，一般需要 100cm 左右長(zhǎng)的層析柱，柱高與直徑之比為 20:1-100:1，柱高過(guò)高時(shí)，凝膠擠壓變形阻塞會(huì)引起較大的反壓，應(yīng)當(dāng)盡可能避免；分組分離（例如脫鹽）時(shí)用短柱，柱高控制在40-50cm 以下，柱高與直徑的比約為 5:1-10:1。

3. 平衡：

上樣前用平衡液平衡層析柱至少3-5個(gè)柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止（例如流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值）；

4. 上樣：

分級(jí)分離時(shí)上樣量一般為5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積。

樣品溶液如有雜質(zhì)或沉淀應(yīng)過(guò)濾或離心除去，樣品的粘度不能過(guò)高，否則影響分離效果。

5. 洗脫方法:

可以用無(wú)鹽水，也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫；在上柱緩沖液中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以充分分離純化；

6. 在位清洗(CIP)

凝膠使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。 方法是以40cm/h用0.1M的*反向清洗四個(gè)柱體積，再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。

7. 保存

凝膠柱暫時(shí)不用，可將其回收，一般方法是將凝膠用水沖洗干凈濾干，可加入0.02%疊氮-化鈉防腐或用20%乙醇浸泡，以控制微生物生長(zhǎng)。

備注：產(chǎn)品信息可能會(huì)有優(yōu)化升級(jí)。請(qǐng)以實(shí)際標(biāo)簽信息為準(zhǔn)。