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PR1300 超低分子量蛋白質(zhì)Marker(3.3-20.1kDa)參考說(shuō)明書(shū)

發(fā)布時(shí)間:2025/11/20點(diǎn)擊次數(shù):65

本產(chǎn)品包含3種多肽和2種低分子量蛋白質(zhì)組成,分子量范圍為3. 3kD-20. 1kD。 可以用來(lái)判斷SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。本品為蛋白質(zhì)和多肽混合物的凍干粉,每種蛋白含量約為15-22.5μg,配有一支1×上樣緩沖液。


凝膠制備及染色注意事項(xiàng):

1. 先配制分離膠,聚合后再配制夾層膠,最后配制濃縮膠,3種膠的制膠體積比為4:1.5:1。電泳時(shí),30v跑1-2小時(shí)后,待指示前沿到達(dá)分離膠上沿時(shí),把電壓調(diào)至100v,至電泳結(jié)束,整個(gè)電泳過(guò)程大約需要6-8小時(shí)。

2. 由于多肽所含的氨基酸數(shù)目較少,因此如該多肽含有過(guò)多的極性氨基酸(堿性或酸性),則會(huì)影響其在SDS-PAGE圖上的條帶遷移率,即其表觀分子量可能和多肽的氨基酸理論推算分子量有一定距離。

3. 由于SDS-PAGE的圖譜上,蛋白質(zhì)對(duì)數(shù)分子量和遷移率成正比直線關(guān)系的分子量范圍為15,000-200,000,因此對(duì)于分子量小于10000的蛋白質(zhì)或多肽的分子量,只能根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)分子量進(jìn)行估計(jì),推斷其是否落入預(yù)測(cè)的分子量范圍。

4. 由于超低分子量多肽(3000及3000以下),極易從凝膠上浸出,因此染色及脫色時(shí)間不宜太長(zhǎng),脫色后凝膠也不宜在水中浸泡保存過(guò)久,否則條帶會(huì)消失。

5. 電泳之后可將膠置于固定液中固定20分鐘,再進(jìn)行染色,能得到較好的蛋白條帶;如時(shí)間不允許,也可不進(jìn)行固定直接染色。如果使用配方7進(jìn)行染色時(shí)效果不好或考慮其毒性,請(qǐng)選擇本公司的考馬斯亮藍(lán)蛋白膠快速染色液(貨號(hào):P1300),該產(chǎn)品具有染色快,無(wú)毒,靈敏性高等特點(diǎn),是常規(guī)染色液的替代品。


與同類產(chǎn)品對(duì)比圖:

相關(guān)產(chǎn)品:

P1015     4×蛋白上樣緩沖液(含DTT)

P1016     4×蛋白上樣緩沖液(含β-巰基乙醇)

A1030     10%PAGE膠凝固劑

T1070     5×Tris-甘氨酸電泳緩沖液

P1300     考馬斯亮藍(lán)快速染色


附:小分子蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳試劑配制

1.  49.5% T  3 % C (配制夾層膠和濃縮膠)

2.  49. 5% T  6 % C (配制分離膠)

丙烯酰胺  48g

甲叉雙丙烯酰胺  1.5g

用ddH20溶解后定容至100mL

丙烯酰胺 46. 5g

甲叉雙丙烯酰胺 3. 0g

用ddH20溶解后定容至100mL

3.  凝膠緩沖液

4.  10×陽(yáng)極緩沖液(下槽緩沖液〕

Tris堿 182g

ddH20  300mL

用HCl調(diào)節(jié)pH值至8.45

用ddH20定容至 500mL

再加入SDS  1.5g

Tris堿 121.1 g

ddH20 400mL

用HCl調(diào)pH值至8.9

用ddH20定容至 500mL

5. 陰極緩沖液(上槽緩沖液)

6. 固定液

Tris堿 12 .11g

Tricine 17.92g

SDS 1g

用ddH20定容至1000mL,此溶液不用調(diào)節(jié)pH值

0.5% 戊二醛

30% 乙醇

用ddH20定容至100mL

7. 染色液


50% 甲醇

10% 乙酸

0.2% 考馬斯亮藍(lán)G-250

用ddH20定容至500mL



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