胰蛋白酶活性測定

原理：胰蛋白酶能催化蛋白質的水解，對于由堿性氨基酸（如精氨酸、賴氨酸）的羧基與其他氨基酸的氨基所形成的肽鍵具有高度的專一性。此外，胰蛋白酶也能催化由堿性氨基酸的羧基所形成的酰胺鍵和酯鍵，有高度的專一性仍表現(xiàn)為對堿性氨基酸羧基一側的選擇對此等化學鍵的催化水解活性的敏感度為：酯鍵＞酰胺鍵＞肽鍵。因此，可以利用含有這些化學鍵中任一種鍵型的底物來研究胰蛋白酶的專一催化活性。

在動物胰臟中，胰蛋白酶是以無活性的酶原狀態(tài)存在的。在生理條件下，胰蛋白酶原隨胰液分泌十二指腸后，在小腸上腔有Ca2+的環(huán)境中，為腸激酶或胰蛋白酶所激活，其肽鏈N-端的賴氨酸與異亮氨酸之間的一個肽鍵被水解，失去一個酸性6肽，其分子構象發(fā)生一定的改變后轉變?yōu)榫哂写呋鞍踪|水解活性的胰蛋白酶。

胰蛋白酶原分子量約為24000，其等電點為pH8.9；胰蛋白酶的分子量約為23400，其等電點為pH10.8。

胰蛋白酶在pH3.0時穩(wěn)定，其濃溶液可貯存于冰箱（0℃以下）數(shù)周而活性無顯著喪失。pH＜3時，胰蛋白酶易變性。PH＞５時，胰蛋白酶易自溶。胰蛋白酶催化活性的適pH為7.6～7.8。

重金屬離子、有機磷化合物和反應產物都能抑制胰蛋白酶的活性。胰臟、卵清和大豆中也含有一些蛋白質對胰蛋白酶活性具有抑制作用。

保存條件：

①胰蛋白酶底物粉劑：4℃保存條件下3個月內有效

②胰蛋白酶底物稀釋液：4℃保存條件下3個月內有效

③樣本勻漿介質：4℃保存條件下6個月內有效