酸性蛋白酶（ACP）活性檢測(cè)試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào)：BC2285
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前加入4 mL試劑五，沸水浴中攪拌溶解；

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：20μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)酪*酸。

產(chǎn)品說明：
ACP是一種在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解的酶。該酶主要用于酒精發(fā)酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。
    酸性條件下，ACP催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪*酸；在堿性條件下，酪*酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)；鎢藍(lán)在680nm有特征吸收峰，通過測(cè)定其吸光度增加，來計(jì)算ACP活性。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
研缽/勻漿器、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、1.5 mL EP管、冰、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：
若反應(yīng)較弱，（A測(cè)定-A對(duì)照）差值較小，可適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（20-30min），即第一步水浴時(shí)間，最后計(jì)算酶活時(shí)對(duì)公式進(jìn)行修改。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1g小鼠肝臟加入1mL提取液冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清，置冰上，之后按照測(cè)定步驟操作，使用96孔板測(cè)得計(jì)算A測(cè)定=0.303，A對(duì)照=0.271，A標(biāo)準(zhǔn)=0.253，A空白=0.044，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：ACP活性（U/g 質(zhì)量）=0.125×（A測(cè)定-A對(duì)照）÷（A標(biāo)準(zhǔn)-A空白）÷W=0.191 U/g 質(zhì)量。

相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

1. Xin-Bin, Gu, Xin, et al. Hematopoietic Substrate-1-Associated Protein X-1 Regulates the Proliferation and Apoptosis of Endothelial Progenitor Cells Through Akt Pathway Modulation[J]. Stem Cells, 2017. (IF 5.614)

2. Shijun Wang, Yunfei Cao, Zuqing Yang, et al. MicroRNA-93-5p increases multidrug resistance in human colorectal carcinoma cells by downregulating cyclin dependent kinase inhibitor 1A gene expression. Oncology Letters. December 2016. (IF 1.874)

相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC2290/BC2295 中性*白酶（NP）活性檢測(cè)試劑盒
BC2300/BC2305 堿性蛋白酶（AKP）活性檢測(cè)試劑盒

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