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北京索萊寶科技有限公司

專注于生物學(xué)試劑及試劑盒領(lǐng)域

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產(chǎn)品中心

PRODUCTS CENTER

當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法氮代謝系列BC1500-50T/24S植物硝態(tài)氮檢測試劑盒 氮代謝

植物硝態(tài)氮檢測試劑盒 氮代謝
產(chǎn)品簡介:

儲存條件
2-8℃
中文名稱
植物硝態(tài)氮檢測試劑盒 氮代謝
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱
Plant Nitrate Nitrogen Content Assay Kit
檢測方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑,詳情見網(wǎng)站說明書

產(chǎn)品型號:BC1500-50T/24S

更新時(shí)間:2024-04-07

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問 量 :1843

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品介紹

植物硝態(tài)氮含量檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

貨號:BC1500

規(guī)格:50T/24S

產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

試劑一

粉劑×2

2-8℃保存

試劑二

液體100 mL×1

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

粉劑×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1、 試劑一:臨用前根據(jù)用量每瓶加入2 mL濃硫酸充分溶解;配制好后盡快使用,2-8℃可保存一周。

2、 標(biāo)準(zhǔn)品:10 mg硝酸鉀,臨用前加入0.935 mL 蒸餾水溶解,配成1400 μg/mLNO3-N標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明:

硝酸鹽是植物吸收的主要含氮物質(zhì)之一。硝酸鹽在植物體內(nèi)的還原部位不同,可以在根內(nèi),也可以在枝葉內(nèi)進(jìn)行且因植物類別和環(huán)境條件而異。因此測定植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量變化對了解氮代謝機(jī)制有重要的意義。

在濃酸條件下,NO3-可以與水楊酸反應(yīng),生成硝基水楊酸,后者在PH>12的條件下呈黃色,在一定范圍內(nèi),其顏色深淺與含量成正比,可比色測定計(jì)算硝態(tài)氮含量。

技術(shù)指標(biāo):

低檢出限:0.7534 μg/mL

線性范圍:0.875-84 μg/mL

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、濃硫酸、冰和蒸餾水。

操作步驟:

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))

按照質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL蒸餾水)加入蒸餾水,室溫勻漿后置于90℃恒溫水浴鍋中浸提30min,期間不斷晃動或者置于90℃恒溫?fù)u床中振蕩提取30min,待冷卻后于25℃,12000g離心15min,取上清待測。

二、測定步驟

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至410nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 1400μg/mL NO3-N標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水50倍稀釋成28μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

3. 操作表:

 

 

試劑名稱

測定管

對照管

標(biāo)準(zhǔn)管

空白管

樣本(μL

40

40



標(biāo)準(zhǔn)溶液(μL



40


蒸餾水(μL


60


40

試劑一(μL

60

-

60

60

充分混勻,25℃靜置30min

試劑二(μL

1400

1400

1400

1400

混勻,渦旋振蕩,使出現(xiàn)的沉淀充分溶解,取1mL1mL玻璃比色皿中測定410nm處吸光值A,計(jì)算ΔA=A測定管-A對照管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。

三、植物NO3-N的計(jì)算

1. 按樣本質(zhì)量計(jì)算

NO3- N含量(μg/g 質(zhì)量)=ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo)準(zhǔn))×V提取÷W=28×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W

2. 按樣本蛋白濃度計(jì)算

NO3- N含量(μg/mg prot=ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo)準(zhǔn))×V提取÷Cpr×V提?。?/span>=28×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr

W:樣本質(zhì)量,g;C標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,28μg/mL;V提取:樣本總體積,1mLCpr:樣本蛋白濃度,mg/mL

注意事項(xiàng):

1.試劑一和試劑二均具有強(qiáng)腐蝕性,操作時(shí)需做好防護(hù)措施。

2.如果樣本吸光值大于1.4,建議將樣本用蒸餾水稀釋后進(jìn)行測定。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

1、 0.1g蘋果加入1mL蒸餾水進(jìn)行樣本處理,取上清后按照測定步驟操作,測得計(jì)算ΔA=A測定管-A對照管=0.560-0.002=0.558,ΔA標(biāo)準(zhǔn)管=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.563-0.01=0.553,按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得:

NO3-N含量(μg/g質(zhì)量)=28×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=28×0.558÷0.553÷0.1=282.5 μg/g質(zhì)量。

2、 0.1g葉片加入1mL蒸餾水進(jìn)行樣本處理,取上清后按照測定步驟操作,測得計(jì)算ΔA=A測定管-A對照管=0.907-0.645=0.262,ΔA標(biāo)準(zhǔn)管=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.563-0.01=0.553,按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得:

NO3-N含量(μg/g質(zhì)量)=28×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=28×0.262÷0.553÷0.1=132.7 μg/g質(zhì)量。

相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):

[1] Fuyuan Zhu,Moxian Chen,Wailung Chan,et al. SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses. Journal of Proteomics. September 2018;(IF3.537)

相關(guān)系列產(chǎn)品:

BC0080/BC0085  硝酸還原酶NR活性檢測試劑盒

BC1450/BC1455  谷*酰胺酶GLS活性檢測試劑盒

BC1460/BC1465  谷*酸脫氫酶GDH活性檢測試劑盒

植物硝態(tài)氮檢測試劑盒 氮代謝 植物硝態(tài)氮檢測試劑盒 氮代謝

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