動物組織中甲醛脫氫酶活性檢測試劑盒輔酶
儲存條件
2-8℃
有效期
6個月
單位
盒
英文名稱
Formaldehyde Dehydrogenase (FDH) Activity Assay kit （Animal Samples）
檢測方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產(chǎn)品型號：BC4980-50T/48S

更新時間：2024-04-18

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：1205

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

動物組織中甲醛脫氫酶（FDH）活性檢測試劑盒說明書

紫外分光光度法

貨號：BC4980

規(guī)格：50T/48S

產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規(guī)格	保存條件
提取液	液體60 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑一	液體35 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑二	粉劑×2支	-20℃保存
試劑三	粉劑×2支	2-8℃保存
試劑四	液體3 mL×1瓶	2-8℃保存

溶液的配制：

1、試劑二：臨用前加入0.25 mL蒸餾水，充分混勻；用不完的試劑-20℃分裝保存兩周，避免反復(fù)凍融。

2、試劑二工作液：根據(jù)試驗(yàn)所需用量，按照試劑二（μL）∶蒸餾水（μL）=1∶29比例配成工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。試劑二工作液當(dāng)天配制當(dāng)天用完。

3、試劑三：臨用前加入1.5 mL蒸餾水，充分溶解；用不完的試劑2-8℃分裝保存兩周。

產(chǎn)品說明：

甲醛脫氫酶存在于絕大多數(shù)原核生物以及所有的真核生物中，是一種將甲醛進(jìn)行轉(zhuǎn)換的氧化還原酶。甲醛脫氫酶可催化甲醛和NAD⁺產(chǎn)生NADH，在340nm處的吸光值會增加，測定340nm處的吸光值變化，可計(jì)算得到甲醛脫氫酶的活性。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱/水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

組織：按照動物組織質(zhì)量（g）：提取液體積（mL）=1∶5~10的比例（建議稱取0.1 g動物組織，加入1 mL提取液），冰浴勻漿，8000 g，4℃條件下離心10 min；取上清（若上清不夠澄清，建議重復(fù)上述離心步驟）置于冰上待測。

二、測定步驟

1、紫外分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長至340 nm，蒸餾水調(diào)零。

2、臨用前將試劑一、試劑四置于37℃預(yù)熱10min。

3、在1 mL石英比色皿中依次加入 100 μL 樣本、550 μL試劑一、250 μL試劑二工作液、50 μL試劑三、50 μL試劑四，立即充分混勻后于340nm處測定20s時的吸光值A1，迅速置于37℃水浴鍋或者培養(yǎng)箱中反應(yīng)5min，拿出迅速擦干測定5min20s時的吸光值A2，記錄 340nm 下20s時吸光值 A1 和 5min 后的吸光值 A2。計(jì)算ΔA=A2-A1。

三、動物組織中甲醛脫氫酶活性計(jì)算

1、按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘催化生成1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。

FDH酶活（U/mg prot）=ΔA÷（ε×d）×V反總×10⁹÷（V樣×Cpr）÷T×F=321.54×ΔA÷Cpr×F

2、按樣本質(zhì)量計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘催化生成1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。

FDH酶活（U/g 質(zhì)量）=ΔA÷（ε×d）×V反總×10⁹÷（V樣×W÷V樣總）÷T×F=321.54×ΔA÷W×F

ε：NADH 摩爾消光系數(shù)，6220 L/mol/cm；d：比色皿光徑，1 cm；V反總：反應(yīng)體系總體積，0.001L；V樣：加入樣本體積，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；10⁹：單位換算系數(shù)，1mol=10⁹ nmol；F：稀釋倍數(shù)。