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北京索萊寶科技有限公司

專注于生物學試劑及試劑盒領域

服務熱線:18101056239

產品中心

PRODUCTS CENTER

當前位置:首頁產品中心蛋白質研究蛋白質提取BC3710全蛋白提取試劑盒(強)

全蛋白提取試劑盒(強)
產品簡介:

全蛋白提取試劑盒(強)用于哺乳動物組織和細胞中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,作用較為強烈,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實驗等基礎研究實驗,由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。

產品型號:BC3710

更新時間:2025-08-29

廠商性質:生產廠家

訪 問 量 :2772

服務熱線

010-50973130

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產品介紹

全蛋白提取試劑盒(強)

用于哺乳動物組織和細胞中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,作用較為強烈,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實驗等基礎研究實驗,由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。

產品組成:

 

 

規(guī)格

儲存條件

裂解液(強)

100 ml

2-8 oC

磷酸酶抑制劑(100x)

1ml

-20 oC

蛋白酶抑制劑(100x)

1 ml

PMSF(100x)

1ml


操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
吸取上清新的管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量:107個細胞需要裂解液1ml;
貼壁細胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細胞裂解液;在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞,
將刮離的細胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
懸浮細胞:4 oC 400g離心收集細胞,用冷的PBS洗兩次細胞,同樣按細胞數加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復3-4次;
裂解完畢之后,將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
將上清移入新的EP管中;
進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
(提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復凍融,避免長時間儲存。)

注意事項:
實驗過程,所有試劑都要需要預冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現用現加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

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《Proanthocyanidins Protect against β-Hydroxybutyrate-Induced Oxidative Damage in Bovine Endometrial Cells》 作者:Xi Cheng,Shuhua Yang,Chuang Xu, Lanzhi Li,Yi Zhang, Yang Guo, Cai Zhang, Peng Li, Miao Long,Jianbin He 期刊:Molecules. 影響因子:3.098 PMID:30678309
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