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2016-2
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免疫細胞的分離和保存技術(shù)
免疫細胞的分離和保存技術(shù)一、分離細胞的保存在某些情況下，分離所得細胞需要加以保存，否則活力迅速下降，甚死亡。（一）短期保存技術(shù)將分離到的細胞用適量含10％～20％滅活小牛血清的Hanks、Tc-199、RPMI1640或其他培養(yǎng)液稀釋重懸。所用培養(yǎng)液要求等滲，具緩沖作用，并對細胞無毒性。通常置4℃保存較好，可減低細胞代謝活動。要注意不要迅速改變細胞所處的溫度，以免造成細胞“溫度”休克。（二）長期冷凍保存技術(shù)利用液氮深低溫（－196℃）環(huán)境保存細胞，是當前世界上通用的細胞長期保...
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2016-1
22

甲醛測定儀之“*
近來，國內(nèi)家具市場上隨處可見商家打出“*”的廣告語，面對這些自稱不含甲醛，但價格卻高出普通家具20%的家具，消費者們很迷糊，不知道是真的沒甲醛，還是坑人的？要想解決這一個疑惑，只有去買一臺家用式甲醛測定儀了。后來，經(jīng)檢驗得知，所謂的“*”*是忽悠人的說法，“由于工藝和成本的限制，*的無醛加工是很難做到的。”業(yè)內(nèi)銷售人士表示，某些“提法”，不過是為了贏得銷量的一種宣傳說法。據(jù)專業(yè)人士得出結(jié)論：無論是符合E2、E1還是E0級標準的人造板，由于其仍然存在持續(xù)的甲醛釋放，當居室存在容...
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2016-1
20

免疫細胞的分離技術(shù) 外周血單個核細胞的分離
免疫細胞的分離技術(shù)外周血單個核細胞的分離用體外方法對機體各種具有免疫反應(yīng)的細胞分別作鑒定、計數(shù)和功能測定，是觀察機體免疫狀態(tài)的一種重要手段。為此，須將各種參與免疫反應(yīng)的細胞從血液或臟器中分離出來。參與免疫反應(yīng)的細胞主要包括淋巴細胞、巨噬細胞、中性粒細胞等。實驗根據(jù)不同需求有的僅需分離白細胞，有的則需分離單個核細胞（mononuclearcell），其中含淋巴細胞和單核細胞（monocyte），有的則需分離T細胞和B細胞以及其亞群。白細胞包括以下細胞外周血中單個核細胞包括淋巴細...
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2016-1
5

DNA Loading Buffer使用說明書
DNALoadingBuffer貨號：D1010規(guī)格：5ml/100ml保存：室溫保存，有效期少12個月。產(chǎn)品簡介：本產(chǎn)品是6倍濃縮的DNA上樣緩沖液，用于DNA凝膠電泳，能促使DNA樣品沉入凝膠加樣孔中。其主要成份為甘油，EDTA，溴酚藍和二甲苯青等。溴酚藍和二甲苯青用作電泳時的指示劑，可指示電泳進程。使用說明：1、請按每5微升DNA樣品加入1微升6×DNALoadingBuffer上的比例(6倍稀釋)來使用。2、混勻后，直接加到DNA凝膠加樣孔中，電泳。注意事項：1、如果...
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2015-12
19

熒光抗體稀釋液使用說明
一抗體稀釋，主要用來稀釋*抗體，稀釋過的一抗可4度保存3-6個月。主要含有蛋白穩(wěn)定劑，PBS，疊氮鈉等，不適合于稀釋酶標記抗體及待標記抗體。酶標抗體稀釋液只適合于稀釋對應(yīng)的抗體，稀釋過的抗體可4度保存3-6個月。熒光抗體稀釋液稀釋過的熒光抗體可4度避光保存一周。免疫熒光抗體稀釋液(ImmunofluorescenceStainingAntibodyDilutionBuffer)可以用于免疫熒光實驗時熒光標記抗體的稀釋和配制。產(chǎn)品添加了抗體保護劑、穩(wěn)定劑等成分，有效增加了稀釋后...
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2015-12
1

Western Blot常見問題及注意事項
WB常見問題常見問題解決對策及注意事項兩快玻璃板之間灌膠,膠總是不平玻璃沒有洗干凈，應(yīng)該要洗得非常干凈過硫酸銨和TEMED的加量不合適，加量相對較多，凝膠凝固過快，也會造成膠不平現(xiàn)象加完試劑以后沒有很好的搖勻，導致有些部位的聚合劑濃度過高，聚合相對較快造成膠不平膠總是漏避免玻璃邊緣（與膠條接觸處）破損膠條一定要干，跑完電泳后，膠條就放在實驗臺上晾著。下面的膠條注意不要老化，如果有裂紋的話用保鮮膜墊在上面，也可以有效防止漏膠將兩塊玻板擺放*對齊，底部處于同一個平面膜上有明顯氣泡...
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2015-12
1

蛋白印跡用緩沖液及洗滌液
轉(zhuǎn)印緩沖液提供了電極之間的電連續(xù)性，其必須是導電的。它還提供了一個化學環(huán)境，能維持蛋白質(zhì)的溶解度，又不妨礙轉(zhuǎn)移過程中蛋白質(zhì)吸附到膜上。傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)印緩沖液包含緩沖系統(tǒng)和甲醇。Tris甘氨酸緩沖液，常用于槽轉(zhuǎn)印系統(tǒng)中。這種緩沖液的pH值為8.3，比大多數(shù)蛋白的等電點（pI）要高。在凝膠上分離的蛋白質(zhì)帶負電荷，向陽極遷移。由于槽內(nèi)的緩沖液是混合的，故轉(zhuǎn)移過程中的離子分布保持相對恒定。在蛋白測序應(yīng)用中，建議使用10mMCAPS緩沖液（pH=11）。凝膠電泳緩沖液中殘留的甘氨酸導致蛋白測...
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2015-12
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尼龍膜、PVDF膜、NC膜區(qū)別
轉(zhuǎn)印膜：用于蛋白質(zhì)和核酸的轉(zhuǎn)移和檢驗過程的微孔膜。Southernblot：又稱Southern印跡雜交，是研究DNA圖譜的基本技術(shù)。Northernblot：又稱Northern印跡雜交，是檢測RNA的基本技術(shù)。Westernblot：又稱Western印跡雜交，是蛋白質(zhì)檢測分析的基本技術(shù)。轉(zhuǎn)印膜在蛋白質(zhì)和核酸的轉(zhuǎn)移和檢測過程中應(yīng)用廣泛，不同的轉(zhuǎn)印膜規(guī)格和參數(shù)不同，選擇正確、均一穩(wěn)定的轉(zhuǎn)印膜對達到的實驗結(jié)果起到關(guān)鍵性的作用。常用的三種轉(zhuǎn)印膜：硝酸纖維素膜（NC膜）、帶正電的...
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